微生物检验技术实训
2012-9
化学工业出版社
胡生梅 编
140
231000
本教材以培养实用型医学检验技术人才为目标，坚持从医学检验岗位对人才的要求出发，按照以学生为主体的行动导向教学原则进行编写。全书包括临床标本采集、标本的前处理、微生物分离培养、微生物的鉴定、药物敏感试验、检验结果报告六大学习情境共二十二个学习项目，最后设计了五个综合技能训练内容。每个学习项目设计了“学习目标”、“知识链接”、“技能训练”、“目标检测”、“技能考核”五个栏目，在明确学习目标和掌握了必备理论知识的前提下，同步进行操作技能训练和理论知识的再学习，最后按照技能考核内容及评分标准对学生进行项目技能的考核，既体现了教学的目的性和可操作性，又便于科学评价学生的学习效果。本书既可供全国高职高专医学检验技术专业师生学习使用，也可供临床检验工作者在临床检验实际工作中参考。
微生物检验技术实训室规则
微生物检验工作中的注意事项
学习情境一临床标本采集
项目一血液标本的采集
项目二脓液、痰液标本采集
项目三尿液、粪便标本采集
学习情境二标本的前处理
项目四细菌形态结构辨认
项目五细菌革兰染色
项目六细菌抗酸染色
项目七痰液洗净与液化
学习情境三微生物分离培养
项目八常用培养基的制备
项目九细菌接种技术
项目十细菌培养技术
项目十一标本的分离培养
学习情境四微生物的鉴定
项目十二形态学检查
项目十三细菌的生物化学试验
项目十四病原性球菌鉴定
项目十五肠杆菌科鉴定
项目十六非发酵菌鉴定
项目十七厌氧菌的鉴定
项目十八分枝杆菌鉴定
项目十九病原性真菌的鉴定
学习情境五药物敏感试验
项目二十扩散法药敏试验
项目二十一稀释法药敏试验
学习情境六检验结果报告
项目二十二检验结果报告
综合技能训练临床标本的微生物检验
综合技能训练一血液标本的微生物检验
综合技能训练二脓液标本的微生物检验
综合技能训练三痰液标本的微生物检验
综合技能训练四尿液标本的微生物检验
综合技能训练五粪便标本的微生物检验
附录
附录一常用生化试剂的配制
附录二常用培养基配制及用途
附录三常用菌种保存方法
参考文献
版权页： 插图： ③结果判定：通常在20～30min内显色，出现黄色为阳性反应。 （6）克氏双糖铁或三糖铁试验 ①原理：将KIA或三糖铁琼脂（TSI）培养基制成斜面，其中葡萄糖含量仅为乳糖或蔗糖的十分之一，若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖和蔗糖，分解葡萄糖产酸使pH降低，因此斜面和底层均先呈黄色，但因葡萄糖量较少，所生成的少量酸可因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，使斜面部分又变成红色；底层由于处于缺氧状态，细菌分解葡萄糖所生成的酸类一时不被氧化而仍保持黄色。细菌分解葡萄糖、乳糖或蔗糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色，且有气泡。细菌产生硫化氢时与培养基中的硫酸亚铁作用，形成黑色的硫化铁。 ②方法：取待检菌落，先穿刺接种到KIA或TSI深层，距管底3～5mm为止，再从原路退回，接着在斜面自下而上连续划曲线，置35℃孵育18～24h，观察结果。 ③结果判定：a.斜面碱性／底层碱性，不发酵碳水化合物，系非发酵菌的特征。b.斜面碱性／底层酸性，葡萄糖发酵、乳糖（和TSI中的蔗糖）不发酵，是不发酵乳糖菌的特征。c.斜面碱性／底层酸性（黑色），葡萄糖发酵、乳糖不发酵并产生硫化氢，是产生硫化氢不发酵乳糖菌的特征。d.斜面酸性／底层酸性，葡萄糖和乳糖（和TSl中的蔗糖）发酵，是发酵乳糖菌的特征。 （7）七叶苷水解试验 ①原理：某些细菌可分解七叶苷为葡萄糖和七叶素，后者与培养基中的枸橼酸铁的铁离子反应形成黑色化合物，使培养基变黑。 ②方法：取待检菌落接种到七叶苷培养基，培养后观察结果。 ③结果判定：培养基变黑者为阳性，不变色为阴性。 2.蛋白质和氨基酸代谢试验 （1）吲哚试验（靛基质试验） ①原理：某些细菌具有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，吲哚与对二甲氨基苯甲醛形成红色的玫瑰吲哚，也称靛基质试验。 ②方法：将待检菌接种于蛋白胨水培养基中，35℃孵育24h，观察结果。 ③结果判定：加入吲哚试剂（对二甲氨基苯甲醛）数滴，在液面交界层呈玫瑰红色为阳性，不变色为阴性。 （2）苯丙氨酸脱氨酶试验 ①原理：细菌产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱氨生成苯丙酮酸，加入三氯化铁试剂与苯丙酮酸螯合后形成绿色化合物。 ②方法：将待检菌接种于苯丙氨酸培养基中，35℃孵育18～24h后观察结果。 ③结果判定：在培养物中滴加10％三氯化铁试剂4～5滴，立即观察菌落生长处，有绿色出现为阳性，否则为阴性。 （3）氨基酸脱羧酶试验 ①原理：具有氨基酸脱羧酶的细菌，分解氨基酸，使氨基酸脱羧生成胺和二氧化碳。由于胺的生成使培养基变为碱性，可用指示剂显示出来。 ②方法：将待检菌分别接种于氨基酸脱羧酶试验管（赖氨酸、鸟氨酸或精氨酸）和氨基酸脱羧酶对照管（无氨基酸），各覆盖至少0.5cm高度的无菌石蜡油，35℃孵育1～4d，观察结果。
《国家骨干高职院校建设项目成果教材:微生物检验技术实训》既可供全国高职高专医学检验技术专业师生学习使用，也可供临床检验工作者在临床检验实际工作中参考。
